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找到 关键词 包含"组织工程" 559条结果
  • 组织工程心脏瓣叶的体外培养

    目的 探讨瓣叶支架种植细胞后 ,不同体外培养时间瓣叶的生成情况。 方法 杂种猪 9只 ,取主动脉 ,分离内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞 ,培养扩增。将成纤维细胞、平滑肌细胞和内皮细胞按顺序种植在预湿处理的支架材料上 ,以首次种植成纤维细胞、平滑肌细胞为起点 ,取 7天、14天和 2 8天样本使用戊二醛固定 ,用扫描电子显微镜 ( SEM)检测 ,对培养 2 8天的样本进行组织学检查。 结果  SEM检测显示 :随着培养时间的延长 ,细胞数量增加 ,细胞间连接出现 ,并有基质生成 ;至 2 8天 ,瓣膜支架上可见大量细胞黏附 ,细胞融合成片 ,表面可见基质形成。支架的细胞覆盖率也随时间的延长明显增加。组织学检测见大量细胞黏附材料 ,细胞已长入材料中部。 结论 体外培养的瓣叶存在生长活性 ,使用组织工程方法有可能生成组织工程心脏瓣膜。

    发表时间:2016-08-30 06:27 导出 下载 收藏 扫码
  • 脂肪干细胞构建可注射型组织工程脂肪的研究进展

    目的总结近年来以脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为种子细胞构建可注射型组织工程脂肪的研究进展。 方法检索国内外ADSCs复合可注射型三维支架材料构建组织工程脂肪的相关研究文献,主要对ADSCs特性、可注射型支架材料创新、分化诱导方式和促进血液供应等方面研究成果进行总结。 结果ADSCs具有数量充足、强大的分泌功能等特性,与多种可注射型支架材料复合后相容性良好,辅以生长因子等促进血液供应的策略,可构建多种形式的可注射型组织工程脂肪。 结论以ADSCs为种子细胞构建可注射型组织工程脂肪虽然面临诸多亟待解决的问题,但其可能为临床上修复软组织缺损和整形填充提供一种优良、易操作的可注射型填充材料。

    发表时间:2016-08-25 10:18 导出 下载 收藏 扫码
  • 脐血间充质干细胞诱导分化为类雪旺细胞修复大鼠坐骨神经损伤的实验研究

    目的评价将人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCBMSCs)来源的类雪旺细胞(Schwann cells,SCs)作为种子细胞,修复大鼠坐骨神经15 mm缺损的效果,为hUCBMSCs应用于临床治疗周围神经缺损提供实验依据。 方法SPF级3月龄雄性SD大鼠45只,体重200~250 g。取新生儿脐带血,淋巴细胞分离液复合高分子量羟乙基淀粉分离培养hUCBMSCs并鉴定;取第3代hUCBMSCs,采用改良化学诱导法联合细胞因子方法诱导分化培养类SCs并鉴定。取15只SD大鼠坐骨神经,采用液氮反复冻融振荡洗涤法制备去细胞神经基膜管作为支架材料;将密度1×107个/mL的类SCs细胞悬液多点注射至该支架内复合培养7 d构建组织工程神经。取SD大鼠30只制备长约15 mm坐骨神经缺损动物模型,根据缺损神经修复方法不同,实验分为A、B、C 3组(n=10),A组采用组织工程神经缝合,B组采用未复合类SCs的去细胞神经基膜管缝合,C组采用自体坐骨神经原位缝合。术后行大体观察、坐骨神经功能指数(sciatic function index,SFI)测定、神经电生理功能检测、腓肠肌湿重测定、Masson染色评价神经修复情况。 结果分离培养的hUCBMSCs高表达MSCs表面标志;诱导培养后类SCs经免疫细胞化学染色检测示神经胶质细胞标志物S100b、胶质纤维酸性蛋白、P75表达呈阳性。术后8周,大体观察示A组组织工程神经管壁无坏死及液化,周围轻度粘连,吻合处连续性较好;B组支架外观与A组相似;C组自体神经周围粘连较A、B组轻,吻合口光滑,无明显膨大,颜色与正常神经相似。各组大鼠术后SFI随时间延长呈逐渐降低趋势,C组SFI 恢复优于A、B组,A组优于B组(P<0.05)。术后各组大鼠远端吻合口处均可检测到神经复合动作电位,波幅及传导速度C组均优于A、B组,A组优于B组(P<0.05)。术后各组大鼠实验侧小腿腓肠肌与健侧相比,均发生不同程度萎缩;腓肠肌湿重恢复率C组优于A、B组,A组优于B组(P<0.05)。Masson染色示A组可见大量再生神经纤维,有髓神经纤维排列较为整齐、致密,纤维直径相似;C组有髓神经纤维密度、直径及髓鞘厚度和轴突直径均明显多于A、B组,A组多于B组(P<0.05)。 结论hUCBMSCs来源的类SCs能够促进大鼠15 mm坐骨神经损伤修复可作为组织工程神经种子细胞来源。

    发表时间:2016-08-25 10:18 导出 下载 收藏 扫码
  • 组织工程骨血管生成的研究进展

    目的对组织工程骨血管生成过程中种子细胞及相关细胞因子研究作一综述。 方法广泛查阅近年来组织工程骨血管生成相关文献,对常见种子细胞来源、生物学特性、转变机制、相关细胞因子及信号通路等进行综述。 结果随着显微外科技术、基因工程技术的发展,组织工程骨血管化细胞共培养体系的研究已有长足进展,无论是诱导性多能干细胞的引入,还是VEGF和血管生成素1双转染MSCs-内皮祖细胞共培养体系,均在骨生成和血管生成中显示出明显优势,但距临床应用仍有距离。 结论采用基因修饰构建的种子细胞-细胞因子-支架材料复合物具有血管生成速度快、效率高、稳定性好的优势,在组织工程骨血管化中具有良好应用前景。

    发表时间:2016-08-25 10:18 导出 下载 收藏 扫码
  • 共价结合生长因子的胶原补片改善大鼠室壁瘤修补术后移植细胞生存率的实验研究

    目的 观察用碳化二亚胺 [1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride chemistry,EDC] 法共价结合血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)+碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)或VEGF的胶原补片对接种于其上的人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesen-chymal stem cells, hBM-MSCs) 作用的体内外表现。 方法 将EDC法活化的胶原补片作对照组,将活化后与VEGF或VEGF+bFGF共价结合的胶原补片作实验组(VEGF组、VEGF+bFGF组),以hBM-MSCs作种子细胞(0.5×106/补片),构建工程化心肌片(engineered heart tissue,EHT)。利用MTT法评价hBM-MSCs在3种支架上的体外增殖情况;结扎雄性SD大鼠左冠状动脉前降支制作心肌梗死后室壁瘤模型,以构建的3种EHT分别行左心室重建术。术后4周取材,抗α平滑肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色观察EHT功能血管再生情况,抗人线粒体抗体(anti-h-mitochondria)免疫荧光染色观察移植细胞生存情况。 结果 (1) hBM-MSCs在VEGF组及VEGF+bFGF组的增殖在移植后2 d、4 d均明显优于对照组(P<0.05)。(2) EHT移植后4周,抗α-SMA免疫荧光染色证明VEGF组及VEGF+bFGF组新生小动脉密度高于对照组(P<0.05); (3)抗h-mitochondria抗体免疫荧光染色示VEGF组及VEGF+bFGF组移植细胞的生存率均高于对照组(P<0.05); (4)相关性分析显示,补片上存留的移植细胞数目与补片新生小动脉密度存在明显的正相关性(r 2=0.99,P=0.02)。 结论 共价结合VEGF或VEGF+bFGF的胶原补片可促进hBM-MSCs的体外增殖;可通过改善局部功能血管的形成改善移植细胞的存活率。

    发表时间:2016-08-30 05:47 导出 下载 收藏 扫码
  • 京尼平交联在胸心外科组织工程领域的应用与研究进展

    脱细胞组织工程支架具有与原生组织相似的结构体系和机械性能,具有良好的生物相容性、有利于细胞的粘附生长、诱导血管再生,且无免疫原性。而京尼平(Genipin)具有抗炎、抗血栓、抗氧化性,抑制血管及内皮细胞炎性活化,并能有效提高生物支架机械性能、抑制炎症并减小降解率。通过京尼平交联脱细胞基质能进一步改善组织工程基质的相关性能,有助于促进组织工程更好地应用于胸心外科临床实践。现对京尼平在胸心外科组织工程领域中的研究现状、展望和可能的前景进行综述。

    发表时间:2016-08-30 05:47 导出 下载 收藏 扫码
  • 心肌组织工程细胞外基质的研究进展

    心肌组织工程技术的问世良好地解决了心肌梗死后组织细胞移植过程中出现的一系列问题,同时也建立为选择更好材料及更好移植手段的技术平台。但无论是动物实验研究还是最近的临床试验都表明,目前细胞移植手段仍存在不少缺陷,主要在于优良种子细胞的缺乏以及移植后细胞的低生存率和低分化率。在这种背景下,作为心肌组织工程支架材料的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)越来越受到人们的关注和重视,成为近些年来医学研究的前沿和热点。而ECM也不再仅仅被理解为一种支架材料或是一种组织,而是能为细胞提供必要信号、影响细胞内增殖、分化和代谢重要途径的关键角色。ECM相关模型大致可分为以下几类:天然生物支架材料、人工合成高分子支架材料以及物理和生物学特性更加平衡的复合支架材料。我们对近几年心肌组织工程领域ECM方面的研究进展及ECM的材料进行综述。

    发表时间:2016-08-30 05:50 导出 下载 收藏 扫码
  • 大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为血管平滑肌样细胞的实验研究

    目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为构建小口径血管种子细胞的可行性及其诱导机制。 方法 取体重100 g左右雄性SpragueDawley(SD)大鼠后肢股骨和胫骨骨髓,采用原代全骨髓培养法,多次传代纯化,体外扩增后,观察细胞形态,并用免疫荧光及流式细胞仪检测CD34、CD90、CD105细胞因子,鉴定是否为BMSCs。将BMSCs分为实验组和对照组:实验组使用含全反式维甲酸及二丁酰环磷酸腺苷(db-cAMP)的低糖基本培养基(DMEM-LG)培养;对照组采用普通的DMEMLG培养。观察诱导后细胞形态,检测诱导后第5代细胞平滑肌α肌动蛋白(SM-α-actin)、钙结合蛋白(calponin)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)的表达情况。 结果 原代培养所获取的细胞经过多次传代培养后呈长梭形,呈现特征性的漩涡状生长,检测CD34阴性,CD90、CD105阳性。实验组经诱导后的BMSCs生长较缓慢,略呈椭圆形,检测SM-α-actin、calponin、SMMHC显著表达;对照组的细胞形态及生长速度和实验组BMSCs相似,但不表达SM-α-actin、calponin和SMMHC。 结论 BMSCs在全反式维甲酸的诱导下可向血管平滑肌样细胞表型分化,可为组织工程构建小口径血管提供平滑肌种子细胞。

    发表时间:2016-08-30 05:57 导出 下载 收藏 扫码
  • 两种组织工程化人工肋骨支架材料的制备及体内外降解实验研究

    目的 选择组织工程界常用的聚乳酸羟基乙酸共聚物/羟基磷灰石(PLGA/HA)与多孔磷酸钙(CPC)两种支架材料,通过体内外降解实验筛选出更为符合组织工程化人工肋骨支架的材料。 方法 将PLGA/HA(PLGA/HA组)和CPC(CPC组)两种材料分别进行体外实验和动物体内实验, 体外实验: 将同等大小的PLGA/HA和CPC材料浸入0.9% NaCl溶液,并保持无菌,放入37℃温箱内,分别于2、4、8、12和24周时取出称重,比较两种材料在体外的降解速度差异;体内实验:将同等大小的PLGA/HA和CPC材料各2片分别植入20只新西兰大白兔脊柱两侧的皮下,于2、4、8、12和24周取出称重,各时间点分别处死4只大白兔;材料周围组织送组织学检查及扫描电子显微镜观察。 结果 薄层CT扫描(Micro-CT)和扫描电子显微镜观察结果,CPC组较PLGA/HA组具有较好的三维结构(1 101.222 8±0.618 4 mg/ccm vs. 1 072.552 3±0.744 2 mg/ccm )及孔隙率(70.26%±0.45% vs.72.82%±0.51%);体外实验显示:两组材料在体外降解速度均较慢,至6个月时才有明显的降解,其中PLGA/HA组降解相对较多,降解了60%;体内实验显示:PLGA/HA组降解比体外更快,3个月时已基本降解完,比CPC组降解快,降解了96%;另外CPC组材料周围的炎症反应明显比PLGA/HA组轻,更适合细胞的生长和黏附。 结论 对再生时间较长的长段肋骨缺损,CPC比PLGA/HA更适合。

    发表时间:2016-08-30 06:06 导出 下载 收藏 扫码
  • Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性

    目的 采用Amplex red荧光法检测组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV)中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase, LOX)的活性。 方法 经胰蛋白酶+乙二胺四乙酸、聚乙二醇辛基苯基醚和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV。用高糖培养基在体外培养瓣膜27 d,再用不含酚酞和血清的培养基培养24h, 收集此时的培养基作为样本,用Amplex red荧光法检测样本中LOX的浓度,同时应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TEHV中LOXmRNA的表达。 结果 样本中LOX的荧光值为45.60±1.66,根据标准曲线获得相应的LOX浓度为0.123±0.003μg/ml,同时各个TEHV均有LOXmRNA的表达,与Amplex red荧光法检测的结果相一致。 结论 应用Amplex red荧光法检测TEHV中LOX的活性具有可行性,并为反映LOX对TEHV细胞外基质中胶原交联的重要作用提供了方法依据。

    发表时间:2016-08-30 06:13 导出 下载 收藏 扫码
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