• 1. 西安交通大学医学部附属三二〇一医院骨科(陕西汉中 723000);
  • 2. 西安交通大学第二附属医院骨科(西安  710004);
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目的 探究 miR-27a 过表达的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)来源外泌体 exo(miR-27a)能否促进骨再生并改善糖皮质激素(glucocorticoids,GC)诱导的股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)(GC-ONFH)。方法 构建 exo(miR-27a),并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot 和实时荧光定量 PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)进行鉴定。采用 qRT-PCR 评估 exo(miR-27a)递送 miR-27a 至成骨细胞 MC3T3-E1 的效果,ALP 染色、茜素红染色及 qRT-PCR 评估其对 MC3T3-E1 细胞成骨的影响。行双荧光素酶报告基因检测验证 miR-27a 靶向 Dickkopf WNT 信号通路抑制剂 2(Dickkopf WNT signaling pathway inhibitor 2,DKK2)是否为潜在机制,并在 MC3T3-E1 细胞内通过 qRT-PCR、Western blot 及茜素红染色进一步验证该机制。最后,通过 SD 大鼠的 GC-ONFH 模型验证 exo(miR-27a)对 ONFH 的保护作用。结果 透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot 和 qRT-PCR 检测示 exo(miR-27a)构建成功。exo(miR-27a)可将 miR-27a 有效递送至 MC3T3-E1 细胞并提高其成骨能力。双荧光素酶报告基因检测示 miR-27a 通过直接靶向 DDK2 促进成骨。动物实验 Micro-CT 及 HE 染色结果显示,尾静脉注射 exo(miR-27a)改善了 SD 大鼠 GC-ONFH 模型的骨坏死情况。结论 exo(miR-27a)可以促进骨再生,并在一定程度上改善 GC-ONFH。

引用本文: 张根生, 刘瑞宇, 党晓谦, 刘继超, 焦海斌. miR-27a 过表达的血管内皮细胞来源外泌体改善股骨头坏死实验研究. 中国修复重建外科杂志, 2021, 35(3): 356-365. doi: 10.7507/1002-1892.202011026 复制

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