• 1. 西安电子科技大学医院内科(西安 710071);
  • 2. 西安交通大学医学院附属红会医院脊柱外科(西安  710054);
  • 3. 榆林市第一医院神经外科(陕西榆林  718000);
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目的 评估壳聚糖-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物[poly(lactide-co-glycolide),PLGA]双壁微球在体外持续缓释具有生物活性的 NGF 的可行性。方法 应用乳化-离子交联方法制备包埋 NGF 的、具有不同三聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,TPP)交联浓度[1%、3%、10%(W/V)]的壳聚糖-PLGA 双壁微球,同时制备包埋 NGF 的 PLGA 微球。通过光镜、扫描电镜、激光共聚焦显微镜观察双壁微球的表面及内部形态,并行双壁微球的粒径分析和红外光谱分析。取包埋 NGF 的 PLGA 微球或 1%、3%、10%TPP 浓度交联的包埋 NGF 的壳聚糖-PLGA 双壁微球(分别设为 A、B、C、D 组),于不同时间点行体外微球降解率测定、微球中 NGF 缓释率检测;以未包埋 NGF 的壳聚糖-PLGA 双壁微球缓释液(设为 A1 组)作为对照,比较 A1、B、C、D 组体外微球缓释液中 NGF 的生物活性(以缓释液中具有阳性轴突延长反应的 PC12 细胞百分比表示)。结果 包埋 NGF 的壳聚糖-PLGA 双壁微球呈球形结构,具有相对粗燥的外表面;激光共聚焦显微镜观察示 PLGA 微球均匀分布于壳聚糖-PLGA 双壁微球内;双壁微球的粒径范围为 18.5~42.7 μm;红外光谱分析结果说明双壁微球中壳聚糖的氨基与 TPP 中的磷酸基发生了静电反应。体外降解率测定显示,B、C、D 组双壁微球降解速度明显快于 A 组,并随着 TPP 浓度的增加而逐渐减慢,培养各时间点各组间微球降解率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。体外 NGF 缓释率测定显示,与 A 组 PLGA 微球相比,B、C、D 组双壁微球以相对较慢的速度缓释 NGF,且缓释速度随 TPP 浓度增加而减慢。除 84 d 外,各时间点 B、C、D 组间比较 NGF 总缓释率差异均有统计学意义(P<0.05)。体外 NGF 的生物活性评估显示,培养各时间点 B、C、D 组缓释液中具有阳性轴突延长反应的 PC12 细胞百分比均显著高于 A1 组(P<0.05)。培养 7、28 d,B、C、D 组间比较差异无统计学意义(P>0.05);56、84 d 时,C、D 组缓释液中具有阳性轴突延长反应的 PC12 细胞百分比显著高于 B 组(P<0.05),C、D 组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 包埋 NGF 的壳聚糖-PLGA 双壁微球在周围神经损伤后的再生方面具有临床应用潜力。