• 南昌大学第二附属医院整形美容科(南昌  330006);
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目的 探讨脂肪干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell derived exosomes,ADSC-Exos)对大鼠皮瓣移植后血管新生的影响。方法 取抽脂术患者自愿捐赠脂肪组织,采用酶消化法分离培养 ADSCs;取第 3 代细胞光镜观察形态,流式细胞术鉴定细胞表面标志物,成脂诱导培养 14 d 后油红 O 染色观察。细胞鉴定为 ADSCs 后,采用密度梯度离心法提取 ADSC-Exos;透射电镜观察形态,Western blot 检测膜表面标志蛋白(CD63、TSG101),纳米颗粒跟踪分析仪测量其粒径分布。取 20 只雄性 SD 大鼠,体质量 250~300 g,随机分为 ADSC-Exos 组和 PBS 组,每组 10 只。两组大鼠背部沿长轴方向制作面积为 9 cm×3 cm 随意皮瓣后,分别于近端、中间和远端区域注射 ADSC-Exos(ADSC-Exos 组)或 PBS(PBS 组)。术后大体观察皮瓣成活情况,第 7 天测算皮瓣成活率后切取皮瓣组织,HE 染色观察组织形态,CD31 免疫组织化学染色测定皮瓣微血管密度(mean blood vessel density,MVD)。结果 光镜、流式细胞术及成脂诱导培养鉴定培养细胞为 ADSCs。ADSC-Exos 为边缘清晰、大小形态均匀的圆形或椭圆形膜性囊泡,高表达标志蛋白 CD63 和 TSG101,粒径分布在 30~200 nm,符合外泌体粒径范围。皮瓣术后两组皮瓣远端均出现不同程度坏死表现,但 ADSC-Exos 组程度较 PBS 组轻;第 7 天 ADSC-Exos 组皮瓣成活率为 64.2%±11.5%,显著大于 PBS 组的 31.0%±6.6%(t=7.945,P=0.000);中间区域皮肤附属器官更完整,近端区域组织水肿程度轻、血管扩张更多。ADSC-Exos 组 MVD 为(103.3±27.0)个/视野,显著多于 PBS 组(45.3±16.2)个/视野(t=3.190,P=0.011)。结论 ADSC-Exos 可通过促进皮瓣移植后新生血管的形成,改善皮瓣血供,进而提高大鼠皮瓣成活率。