张彬 1,2 , 沈师 1,2 , 鲜海 1,2 , 代永静 2 , 郭维民 2 , 李旭 2 , 张学亮 2 , 王振勇 2 , 李浩江 2 , 彭礼庆 1,2 , 罗旭江 1,2 , 刘舒云 2 , 鲁晓波 1 , 郭全义 1,2
  • 1. 西南医科大学附属医院骨与关节外科(四川泸州 646000);
  • 2. 解放军总医院骨科研究所 骨科再生医学北京市重点实验室 全军骨科战创伤重点实验室(北京  100853);
导出 下载 收藏 扫码 引用

目的 采用低温沉积 3D 打印技术制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]支架,复合脱细胞软骨细胞外基质(decellularized articular cartilage extracellular matrix,DACECM)制备 PLGA/DACECM 组织工程软骨支架,探讨其理化特性。方法 利用低温沉积 3D 打印技术制备 PLGA 支架。采用改良式物理、化学脱细胞方法制备 DACECM 混悬液。利用冷冻干燥和物理化学法交联技术制备 DACECM 取向支架,同法将 DACECM 混悬液与 PLGA 支架复合制备 PLGA/DACECM 取向支架。通过大体观察、扫描电镜观察 3 种支架宏观、微观结构,组织学及免疫组织化学染色定性分析 DACECM 取向支架成分,生物力学试验检测 3 种支架压缩模量。于 SD 大鼠皮下包埋 3 种支架,HE 染色观察免疫排斥反应。分离培养新西兰大白兔软骨细胞,制备 3 种细胞-支架复合物,扫描电镜观察细胞在支架上的生长黏附情况。取鼠 L-929 成纤维细胞分别于 3 种支架浸提液进行培养,以 DMEM 培养液培养细胞作为对照,细胞计数试剂盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测细胞增殖情况。 结果 大体观察和扫描电镜观察示,PLGA 支架表面较光滑,可见大孔;DACECM 取向支架表面粗糙,为疏松多孔相互连通的三维立体结构;PLGA/DACECM 取向支架表面粗糙,大孔与小孔相互连通,具有垂直三维立体结构。组织学及免疫组织化学定性分析显示,DACECM 脱细胞完全,保留了软骨基质的糖胺聚糖和Ⅱ型胶原蛋白成分。生物力学检测示,DACECM 取向支架压缩模量显著低于其余 2 种支架(P<0.05),PLGA 支架和 PLGA/DACECM 取向支架间差异无统计学意义(P>0.05)。SD 大鼠皮下包埋实验示,DACECM 取向支架和 PLGA/DACECM 取向支架的免疫排斥反应明显低于 PLGA 支架。细胞-支架复合物扫描电镜观察示,软骨细胞在 PLGA 支架上未见明显黏附,大量软骨细胞在 PLGA/DACECM 取向支架和 DACECM 取向支架表面黏附、生长。CCK-8 检测示,随培养时间延长,各组细胞数量均呈递增趋势,各时间点组间吸光度(A)值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PLGA/DACECM 取向支架具有无细胞毒性、优良的理化性能,有望成为一种组织工程软骨支架材料。

引用本文: 张彬, 沈师, 鲜海, 代永静, 郭维民, 李旭, 张学亮, 王振勇, 李浩江, 彭礼庆, 罗旭江, 刘舒云, 鲁晓波, 郭全义. 3D 打印制备 PLGA/脱细胞软骨细胞外基质支架材料及其理化特性研究. 中国修复重建外科杂志, 2019, 33(8): 1011-1018. doi: 10.7507/1002-1892.201901082 复制

  • 上一篇

    带蒂大网膜瓣在乳腺癌术后乳房再造中的应用研究
  • 下一篇

    组织工程半月板支架材料的研究进展