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目的 探讨将联合培养血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的培养体系作为种子细胞的组织工程骨异位成骨能力。方法 采用纤维粘连蛋白复合部分脱蛋白骨(partially deproteinised bone,PDPB)制备部分脱蛋白生物骨(partially deproteinised biologic bone,PDPBB);分离培养 18 周龄 SD 大鼠 ADSCs 及足月妊娠 SD 大鼠脐血 VECs。体外构建 3 种组织工程骨:PDPBB+VECs(A 组)、PDPBB+ADSCs(B 组)、PDPBB+联合培养细胞(VECs∶ADSCs 为 1∶1,C 组),以单纯 PDPBB 为对照组(D 组)。细胞移植后 10 d 行扫描电镜观察细胞在各组支架上的黏附情况。取 18 周龄 SD 大鼠 48 只,随机分为 A、B、C、D 4 组,每组 12 只。分别将 A、B、C、D 4 种支架材料植入相应组别的大鼠股部肌袋,术后 2、4、8、12 周处死动物行大体观察及 HE 染色和 Masson 染色组织学观察,并取 Masson 染色切片行骨胶原量定量检测。结果 扫描电镜观察示,PDPB 材料孔隙内部相互连通;纤维粘连蛋白修饰的 PDPBB 表面大量片状蛋白结晶松散附着于支架表面;复合细胞联合培养 10 d 后,C 组大量细胞与 PDPBB 附着,细胞相互堆积形成细胞团,多角形细胞和梭形细胞混合分布,细胞沿骨小梁生长,形成细胞层。大体观察示术后 2 周各组肉芽组织开始长入材料孔隙。C 组自 4 周后材料表面逐渐产生大量白色软骨样物质,表面高低不平。至 12 周时,A 组材料表面血管量增多,材料呈实变;B 组材料表面出现少许白色软骨样物质,但材料孔隙未见明显减小;D 组材料孔隙大小未见明显减小。组织学观察可见术后 2 周,各组间骨胶原量比较差异无统计学意义(F=2.551,P=0.088);术后 4、8、12 周,C 组骨胶原量显著高于其余 3 组,B 组高于 D 组,差异均有统计学意义(P<0.05);A 组与 B、D 组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 联合培养 VECs 与 ADSCs 作为种子细胞构建组织工程骨的异位成骨能力最强。

引用本文: 王福科, 张红, 李彦林, 刘流, 何川, 蔡国锋, 宋恩. 联合培养血管内皮细胞与脂肪干细胞构建组织工程骨异位成骨. 中国修复重建外科杂志, 2019, 33(10): 1310-1319. doi: 10.7507/1002-1892.201808111 复制

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