• 兰州大学第二医院骨科 甘肃省骨与关节疾病重点实验室(兰州 730000);
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目的研究 Piezo1 机械敏感型离子蛋白在小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞迁移中的作用。方法取第 5~10 代小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞,分为 Piezo1-小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)转染组(A 组)、阴性对照组(B 组)和空白对照组(C 组)。A、B 组分别采用 siRNA 转染试剂将 Piezo1-siRNA 或阴性对照 siRNA 转染入小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞,C 组仅加入 siRNA 转染试剂,在倒置相差显微镜及荧光显微镜下观察细胞形态并计算转染效率。采用免疫荧光染色和 Western blot 检测各组 Piezo1 蛋白表达水平;采用 Transwell 细胞迁移实验和细胞划痕实验检测 Piezo1-siRNA 转染后 MC3T3-E1 成骨细胞迁移能力的变化。结果转染 48 h 后,A 组可见细胞体积较未转染细胞略有增大,细胞突变长增粗,但细胞集落有所减少,悬浮细胞较未转染增多,细胞碎片增多。荧光显微镜下可见 B 组小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞中出现绿色荧光,转染效率为 68.56%±4.12%。免疫荧光染色及 Western blot 检测示,A 组细胞内 Piezo1 蛋白表达水平均显著低于 B、C 组,差异有统计学意义(P<0.05);B、C 组间差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell 细胞迁移实验及细胞划痕实验检测示,A 组每孔迁移细胞数及培养 1~4 d 的细胞划痕愈合率均明显低于 B、C 组,差异有统计学意义(P<0.05);B、C 组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默 Piezo1 基因能显著抑制小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞的迁移能力。

引用本文: 闫亮, 姜金, 马崇文, 李睿, 夏亚一. 沉默 Piezo1 机械敏感型离子通道对 MC3T3-E1 成骨细胞迁移的影响. 中国修复重建外科杂志, 2019, 33(1): 28-34. doi: 10.7507/1002-1892.201806121 复制

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