尹刚 1,2 , 刘蔡钺 3,4 , 林耀发 2 , 谢铮 2 , 侯春林 2 , 林浩东 2
  • 1. 海军军医大学(第二军医大学)细胞生物教研室(上海 200433);
  • 2. 海军军医大学(第二军医大学)附属长征医院骨科(上海  200003);
  • 3. 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科(上海 200011);
  • 4. 海军军医大学(第二军医大学)附属长征医院整形外科(上海 200003);
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目的探讨脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)来源外泌体对周围神经损伤后再生的影响,为周围神经损伤寻找新的治疗方法。 方法将 36 只成年 SD 大鼠(雌雄不限,体质量 220~240 g)随机分成 3 组,每组 12 只。A 组为正常对照组,B 组为坐骨神经挤压损伤组,C 组为 ADSCs 来源外泌体治疗坐骨神经挤压损伤组。A 组仅暴露坐骨神经后直接缝合切口,B、C 组制备坐骨神经挤压损伤模型;术后次日开始,A、B 组于大鼠尾静脉注射 PBS 液 200 μL,C 组注射含 100 μg ADSCs 来源外泌体的 PBS 液 200 μL,每周注射 1 次,连续 12 周。注射结束 1 周后处死大鼠,取损伤处坐骨神经,分别行大体观察、HE 染色观察神经束情况、TUNEL 检测坐骨神经雪旺细胞(Schwann cells,SCs)凋亡情况,透射电镜观察坐骨神经超微结构和 SCs 自噬情况。 结果大体观察示 A 组患肢无明显异常,B、C 组患肢瘫痪、肌肉萎缩,但 C 组瘫痪及肌肉萎缩程度轻于 B 组。HE 染色示,A 组神经束膜形态规则;B 组神经束形态破坏、束膜不规则,有较多无细胞结构和组织碎片;C 组神经束膜较完整,明显优于 B 组。TUNEL 检测示,B、C 组 SCs 凋亡细胞数显著多于 A 组,B 组显著多于 C 组,差异均有统计学意义(P<0.01)。透射电镜观察示,B、C 组 SCs 自噬体较 A 组明显增加,但 C 组少于 B 组。 结论ADSCs 来源外泌体对周围神经损伤后再生有一定促进作用,其机制可能与减少 SCs 凋亡、抑制其自噬、减轻神经瓦勒变性有关。

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